鑫雙寶生物

豬流感（Swine Influenza, SI）是由正粘病毒科豬流感病毒（SIV）引起的一種急性、高度接觸傳染性的豬呼吸道疾病，臨床以突發(fā)、咳嗽、呼吸困難、發(fā)熱、衰竭、迅速康復(fù)或死亡為特征。該病呈地方性流行，世界性分布，可發(fā)生于各年齡和各品種豬，發(fā)病率高達100%。SI是主要的豬免疫抑制病之一，在規(guī)模化養(yǎng)豬場中普遍存在，難以根除。SI能直接引起患豬的死亡，并使患豬生產(chǎn)性能下降，肉料比降低，直接影響豬群健康狀態(tài)和質(zhì)量，對養(yǎng)豬業(yè)危害很大；更值得重視的是，SIV對呼吸道上皮細胞具有高度特異親嗜性，SIV的感染，致使豬體與外界的天然屏障被破壞，導(dǎo)致胸膜肺炎放線桿菌、嗜血桿菌、巴氏桿菌、豬2型鏈球菌、豬呼吸道冠狀病毒、豬呼吸-繁殖障礙綜合征病毒等的繼發(fā)或混合感染（Van Reeth et al，2000；Thacker et al，2001），使疫情變?yōu)閺?fù)雜，病情加重，造成飼料、人工的巨大浪費及藥物的無謂消耗，死亡率增高，由此引起的經(jīng)濟損失更無法估量。

世人對豬流感的高度重視，除了其顯而易見的獸醫(yī)傳染病學(xué)意義，更在于其深遠的公共衛(wèi)生意義以及在流感病毒流行病學(xué)、種間傳播中不可替代的特殊地位和作用。SIV具有最大限度感染人的能力，直接影響到畜產(chǎn)品安全，對人類健康有潛在的威脅，在人體器官移植研究中，作為人體器官移植供體的豬必須排除SI的感染?；仡櫲祟惲鞲惺?，20世紀人流感的3次大流行都和SI密切相關(guān)，而1976年1月，美國新澤西洲佛迪狄克斯5名新兵因感染豬源H1N1病毒、1人死于肺炎的事件，則是SI人畜共患病史上的里程碑；此后，至少有12人因感染SIV而死亡。大量研究表明，豬在“禽-豬-人”的種間傳播鏈中，充當(dāng)禽、人、豬流感病毒重組和復(fù)制的“混合器”，扮演著流感病毒中間宿主及多重宿主的作用，SI在人和動物流感的病原學(xué)、生態(tài)學(xué)及流行病學(xué)中占有舉足輕重的地位。

SI是一種世界性分布的群發(fā)性傳染病，對SI的研究已有80多年的歷史。近年，SI出現(xiàn)了新的疫情，特別是在中國，不僅H1和H3亞型SI有抬頭和蔓延的趨勢，而且在某些省份和地區(qū)豬群中出現(xiàn)了H5和H9亞型流感病毒的感染，但我國對SI的研究相對滯后。20世紀末，李海燕等率先在全國大范圍進行SI疫病的血清學(xué)和病毒學(xué)調(diào)查研究，對SI的診斷、疫苗、分子生物學(xué)及分子流行病學(xué)等方面進行了全面研究，進展喜人。本文著重將中國SI研究進展情況簡要概述如下。

SI一直是豬群中難以根除的呼吸道疾病之一。近年，豬群中除了常見的經(jīng)典型H1N1、類禽型H1N1和類人型H3N2流感病毒引起的SI外，由重組病毒H1N2、H1N7、H3N6引起的SI也時有報道。1998年，美國卡羅萊納洲、明尼蘇達洲、愛荷華洲和德克薩斯洲接種了H1N1SI疫苗的四個豬場暴發(fā)了嚴重的SI，研究表明，其病原為H3N2人-豬雙重組病毒株和人-豬-禽三重組病毒株，母豬發(fā)病嚴重，有3%-4%的母豬出現(xiàn)流產(chǎn)，產(chǎn)仔率降低5%-10%，斷奶前仔豬死亡率高達4%-5%；23個洲的4382份血清樣品中抗三重組病毒株抗體陽性率為20.5%，抗經(jīng)典H1N1SIV抗體陽性率為28.3%；到1999年，從俄克拉荷馬洲、伊利諾斯洲、科羅拉多洲、威斯康星洲及北卡羅萊納洲又分離出三重組H3N2 SIV，血清學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，該病毒引起的SI幾乎遍及整個美國，由此說明，該病毒對豬有很好的適應(yīng)性并很快在豬群中傳播開。1999年，普遍流行于水鳥中的H4N6 禽流感病毒（AIV），首次從北美中東部安大略湖自然感染的豬體中分離到，1999年香港報道從豬群中分離到4株H9N2亞型流感病毒。

2000至2003 年間，我們從中國東北、西北、華中、華東、華南及西南地區(qū)20個省、市及自治區(qū)豬群中分離到116株不同亞型SIV，其中，45株為H3N2，25株為H1N1，2株為H1N2，8株為H9N2，2株為H5N1。值得人們關(guān)注的是，H5N1亞型流感病毒已傳入我國豬群中，李海燕等從2001年東部沿海暴發(fā)SI的某豬群的病毒分離物中鑒定了1株病毒為H5N1亞型，該豬群同時伴有H1N1和H3N2亞型SI的協(xié)同發(fā)生和流行。當(dāng)時該豬群表現(xiàn)出嚴重的呼吸道癥狀、高熱、咳嗽、打噴嚏，懷孕母豬流產(chǎn)率高達10％以上，母豬、仔豬、育肥豬相繼發(fā)生，病死率在5％以上，緊急免疫自家疫苗后有所緩解，但病情易反復(fù)。2003年4月，從該地區(qū)進行的SI血清學(xué)和病原學(xué)調(diào)查結(jié)果表明，該地區(qū)豬群中存在抗H5N1亞型流感病毒抗體，陽性率為9.5%；其抗體水平相差較大，該豬群曾在1.5年前注射自家苗，說明并非是疫苗免疫產(chǎn)生的抗體。另外，從該豬群采集的鼻棉拭子中再次分離到了1株H5N1亞型流感病毒。

豬流感的診斷，可根據(jù)流行病學(xué)、臨床癥狀和病理變化作出初步診斷。本病的特點為各種年齡、性別和品種豬都可感染，大多在深秋、早春和氣候驟變時發(fā)生流行；常在幾天內(nèi)全群感染，病程短，發(fā)病率高而死亡率低，臨床可見支氣管肺炎癥狀和病變；同期若有人流感的流行則更有參考價值。豬流感的確診，必須通過病原學(xué)診斷（病毒分離鑒定）和血清學(xué)診斷（特異性抗原或抗體檢測）。

已建立的特異性抗原或抗體的檢測方法有血凝抑制試驗（HI）、瓊脂擴散試驗（AGP）、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）等。同時，應(yīng)注意與豬喘氣病、豬傳染性萎縮性鼻炎、豬傳染性胸膜肺炎、豬繁殖-呼吸障礙綜合征等其它病的鑒別診斷。

快捷有效的診斷方法是疫病防制的關(guān)鍵，血清學(xué)診斷技術(shù)是SI定性診斷、常規(guī)亞型鑒定最實用、確實的方法。哈爾濱獸醫(yī)研究所農(nóng)業(yè)部動物流感重點開放實驗室從國外引進豬流感病毒（H1、H3亞型）標(biāo)準(zhǔn)毒株，建立了既可檢測抗原亦可檢測抗體的SI瓊脂免疫擴散（AGP）診斷方法，同時建立了紅細胞凝集（HA）試驗、紅細胞凝集抑制（HI）試驗、神經(jīng)氨酸酶抑制（NI）試驗等常規(guī)血清學(xué)診斷及亞型鑒定方法，為全面開展我國SI疫情的調(diào)查研究打下基礎(chǔ)。在此基礎(chǔ)上，以全病毒抗原和重組核蛋白抗原為基礎(chǔ)，開展了SI間接ELISA、抗原捕捉ELISA和PCR-ELISA診斷技術(shù)的研究，以滿足生產(chǎn)實踐及科學(xué)研究等對SI診斷的不同需求。

由于SI的臨床癥狀和剖檢變化差別較大且隨其并發(fā)或繼發(fā)感染情況、感染病毒株致病力高低、病程長短、應(yīng)激及管理情況不同表現(xiàn)也不盡相同，而且無一為特征性癥狀和剖檢變化，所以SI的確診最確實的應(yīng)依據(jù)病毒的分離鑒定。哈爾濱獸醫(yī)研究所農(nóng)業(yè)部動物流感重點開放實驗室在多年禽流感研究的工作實踐基礎(chǔ)上，建立了SIV的分離鑒定技術(shù)體系，制備了SIV血凝素（H1、H3、H9亞型）和神經(jīng)氨酸酶（N1、N2亞型）的分型試劑，從我國東北、西北、華中、華東、華南及西南地區(qū)收集、分離、鑒定了116株SIV，建立了SIV中國分離株種毒庫。值得一提的是，在病毒的分離鑒定工作中，對初步鑒定為SIV的分離物必須進行純化后方可進行進一步的亞型鑒定，流感病毒可用雞胚進行有限稀釋克隆進行純化。

SI最確實、最經(jīng)典的診斷方法是病毒的分離鑒定及其生物學(xué)特性測定，耗時費力并要求較高的實驗條件，不能滿足急性傳染病緊急疫情防制工作的需要，為解決SI防制實踐中疫病的直接早期快速診斷及鑒別診斷的技術(shù)難題，哈獸研開展了豬流感分子診斷及分子鑒別診斷技術(shù)的研究。在H1和H3亞型HA基因克隆和序列分析研究的基礎(chǔ)上，建立了直接從豬鼻棉拭子或病料樣品中檢測H1和H3亞型SIV的多重套式RT-PCR診斷法，無需進行病毒分離鑒定（常需時10多天）即可達到監(jiān)測或鑒別診斷H1和H3亞型SIV感染的目的。以基因工程表達抗原和單抗為基礎(chǔ)的SI亞型特異性分子診斷研究已獲突破性進展，已獲得表達有H1和H3亞型特異性基因（HA、NA）的真核分泌型重組表達載體或/和重組病毒，并實現(xiàn)了在昆蟲細胞中的高效表達。

哈獸研SI研究組率先在全國范圍內(nèi)開展SI的血清學(xué)和病原學(xué)調(diào)查研究，2000～2003年，對黑龍江、吉林、遼寧、山東、內(nèi)蒙、河南、河北、江蘇、安徽、浙江、湖北、福建、廣東、廣西、海南、成都、重慶、上海等19個省、市、自治區(qū)1985份豬鼻棉拭子樣品和死亡豬肺、氣管樣品以及4214份血清樣品進行研究，基本掌握了我國不同地區(qū)SI的疫情、流行和分布情況。從SI的血清學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，我國東北、華北、華中、華南、西南、西北等地區(qū)的豬群均不同程度地受到SIV的感染。總體上看，我國豬群中H1N1和H3N2亞型流感相當(dāng)普遍，感染豬場波及我國東北、西北、華中、華東、華南及西南地區(qū)，感染陽性率最高可達100％；呈全國性分布，并經(jīng)常協(xié)同發(fā)生和流行；從2000到2003年，豬群中的抗H1流感病毒抗體呈逐年遞增的趨勢，陽性率分別為3.4%、9.5%、10.5%和12.0%，說明H1亞型 SIV自20世紀70年代傳入中國臺灣、香港豬群后，近幾年在中國大陸豬群呈現(xiàn)蔓延趨勢?？笻3亞型流感病毒抗體從2000至2002年呈逐年遞增，陽性率分別為19.4%、25.1%和68.4%，但2003年有所下降，為24.0%，采集血清的豬場在1年內(nèi)都未注射SI疫苗或自家苗。我們知道，H3N2亞型SIV是繼1968年“香港流感”流行之后，1969年在臺灣豬群中首次分離到的，此后便長期存在于中國各地的豬群中；由于豬群中抗H3亞型流感病毒抗體的普遍存在，使H3亞型SI的流行和傳播趨向于自限性，抗體檢測結(jié)果也體現(xiàn)了這種趨勢。

2002年，東北、華北、華南及西南的豬群中抗禽源H9N2亞型流感病毒抗體的陽性率分別為5.6%、4.5%、6.8%及1.9%，但2003年采集的豬血清中均未出現(xiàn)。2003年采集的血清樣品中出現(xiàn)抗禽源H5N1亞型流感病毒抗體，華南、華東地區(qū)豬血清抗體陽性率分別為3.9%和9.5%。從研究結(jié)果看，H5和H9亞型SI的出現(xiàn)和流行與我國同亞型禽流感（AI）的流行呈現(xiàn)一定的平行發(fā)展關(guān)系。20世紀末21世紀初，H9N2亞型AI在我國廣泛流行，曾一度給我國養(yǎng)禽業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失，近年由于疫苗的使用和禽群中抵抗力的出現(xiàn)，H9亞型AI逐漸趨于穩(wěn)定。而且，H5N1亞型AIV引起的'97香港“禽流感事件”曾導(dǎo)致人的感染發(fā)病和死亡。H5亞型AI在我國開始擴散蔓延，其嚴重程度已不容忽視。我國南部沿海地區(qū)由于特有的生態(tài)條件和生活習(xí)慣使流感病毒得以在人、豬和禽（雞、鴨等）之間交叉循環(huán)感染，給病毒提供了特有而復(fù)雜的演化環(huán)境和孵育溫床。豬作為禽、豬、人流感病毒基因重組的混合器，任何新亞型的A型流感病毒從該地區(qū)豬群中分離到都不足為奇。在此背景下，從我國豬群中檢測到抗H5亞型流感病毒抗體并分離到H5N1亞型SIV，盡管可以理解但卻足以使世人震驚和關(guān)注，同時也給我們敲響了警鐘。我們知道，20世紀每次人流感的大流行都和SI密切相關(guān)。引起1918年“西班牙流感”的H1N1毒株的HA基因是SIV和人流感病毒的基因內(nèi)重組，該病毒在1918年以前已在豬等哺乳動物體內(nèi)存在多年并獲得感染人的能力，由豬傳染給人，從而引起這次瘟疫性流感大流行；引起1957年“亞洲流感”和1968年“香港流感”的H2N2和H3N2毒株也都經(jīng)過豬體的基因重配和適應(yīng)過程。因此，對SI的監(jiān)測作為預(yù)測和防止流感大暴發(fā)的最重要手段在歐美國家早已引起關(guān)注并達成共識。那么，這些從中國南部沿海地區(qū)豬群中分離到的H5N1流感病毒和'97香港“禽流感事件”中H5N1流感病毒的遺傳演化關(guān)系如何？是否有進一步的進化關(guān)系？這些演化能否導(dǎo)致病毒致病力和宿主范圍的改變以及其潛在的公共衛(wèi)生意義如何？這些都將是引起世界關(guān)注的重要課題。

哈獸研農(nóng)業(yè)部動物流感重點開放實驗室SI研究課題組用有限稀釋克隆法對獲得的SIV分離株進行純化并對其生物學(xué)特性及抗原特性進行研究，所有SIV分離株對雞都不表現(xiàn)為高致病性，經(jīng)雞胚分離傳代后SIV分離株均能凝集0.7% 人“O”型血、綿羊、兔、豚鼠、小白鼠、大白鼠及雞的紅細胞，大部分H3亞型SIV分離株表現(xiàn)為親和相，為類TKUK63毒株，表現(xiàn)出一定的地域類群；部分分離株經(jīng)雞胚傳代后，出現(xiàn)了相別的變異^[9]。這種相別和相變在流感流行病學(xué)、流感監(jiān)測和診斷中均有重要意義。

哈獸研SI研究課題組對所采病料或所收集到的SIV初步分離物及血清學(xué)調(diào)查陽性的原發(fā)病豬場進行SI的流行病學(xué)背景及生態(tài)學(xué)研究，包括豬群歷史或發(fā)病情況、豬場環(huán)境、管理及防疫措施等，掌握了SI第一手臨床流行病學(xué)和生態(tài)學(xué)材料。調(diào)查發(fā)現(xiàn)，目前在中國的豬群幾乎都未注射SI疫苗，因此，豬群中抗流感病毒抗體可以客觀地反應(yīng)豬群受SI感染的情況，高密度、多應(yīng)激的集約化養(yǎng)豬和惡劣的養(yǎng)殖環(huán)境以及不完善的防疫及管理制度是致使許多老病久防不止，病情反復(fù)，新的疫病又不斷出現(xiàn)和蔓延的根本原因，SI的大范圍感染已嚴重威脅養(yǎng)豬業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展及畜產(chǎn)品的安全。

世界SI防制經(jīng)驗表明，疫苗免疫是預(yù)防和控制SI暴發(fā)的有效措施和主動性戰(zhàn)略，在歐美國家，SI免疫已成為養(yǎng)豬場的一項常規(guī)免疫，有些SI疫苗已商品化，如MaxiVac-Flu（H1N1亞型豬流感滅活疫苗）、PRV/Marker Gold-- MaxiVac-Flu（豬偽狂犬病四基因缺失疫苗- H1N1亞型豬流感滅活疫苗）、MaxiVac- M+（H1N1亞型豬流感-豬肺炎霉形體滅活疫苗）、MaxiVac Excell（H1N1亞型H3N2亞型豬流感二價聯(lián)苗），我國至今沒有商品化的SI疫苗。

血清學(xué)調(diào)查和毒株監(jiān)測研究發(fā)現(xiàn)，1999－2003年間我國東北、西北、華中、華東、華南及西南地區(qū)等20個省、市豬群大范圍存在H1和H3亞型SI感染，同時證實H9N2亞型病毒在我國豬群中的存在，并首次發(fā)現(xiàn)我國豬群已感染H5N1亞型流感病毒，為人類流感及動物流感的防制敲響了警鐘。從2000－2003年收集和送檢的樣品中分離鑒定了45株H3N2亞型、25株H1N1亞型、2株H1N2亞型、8株H9N2亞型和2株H5N1亞型SIV。我國的SI已呈現(xiàn)抬頭蔓延之勢，疫情復(fù)雜而不容樂觀，已經(jīng)嚴重威脅到我國養(yǎng)豬業(yè)的健康穩(wěn)定發(fā)展，不做好SI的防制工作，將直接影響人民的身體健康和社會的穩(wěn)定。

中國農(nóng)科院哈爾濱獸醫(yī)研究所科研人員在近年我國SI血清學(xué)調(diào)查和毒株監(jiān)測基礎(chǔ)上，對分離自中國不同地區(qū)、不同亞型SIV流行株的生物學(xué)特性進行研究，綜合分析SI毒株監(jiān)測及其生物學(xué)特性分析結(jié)果，篩選出免疫原性好、與全國范圍流行的H1N1和H3N2亞型各抗原群均有很好抗原反應(yīng)性、對雞胚高滴度適應(yīng)、在雞胚中生長性狀良好的流行株作為種毒，在SI滅活疫苗研究方面已取得突破性進展。首先，完成了毒種的分離鑒定、毒種含量測定、血清學(xué)特性測定、毒種致病力測定、毒種的免疫原性和抗原性測定、毒種的純粹性檢驗和保存期試驗等毒種各項研究工作。其次，研制了SI H1N1亞型和H3N2亞型單價滅活疫苗及H1N1－H3N2亞型雙價滅活疫苗，其生產(chǎn)工藝（包括病毒繁殖與滅活試驗、佐劑比較試驗、疫苗佐劑的配制和乳化工藝試驗等）、終產(chǎn)品配制及檢驗、安全性試驗、免疫效力試驗、免疫攻毒效力與抗體水平的平行關(guān)系試驗、免疫期試驗、保存期試驗等實驗室試驗基本完成，結(jié)果理想。田間實驗結(jié)果表明，疫苗免疫后無任何不良反應(yīng)，可有效預(yù)防H1和/或H3亞型SIV引起的SI，保護率高，免疫期持續(xù)時間長，可有效降低高熱、咳嗽、呼吸困難等臨床癥狀，增加平均日增重，顯著改善飼料轉(zhuǎn)化率，安全、有效，對仔豬、育肥豬、母豬均具有免疫保護。SI診斷試劑和滅活疫苗現(xiàn)正進行中間試制和區(qū)域試驗。該研究中各項內(nèi)容均已達到國際同類研究先進水平，填補了我國SI診斷與防制研究的空白。

為建立SIV中國分離株分子流行病學(xué)、遺傳變異與演化等相關(guān)信息數(shù)據(jù)庫，探討不同亞型SIV中國分離株的基因來源、進化及其在流感病毒種間傳播中的作用，哈獸研SI研究組在現(xiàn)有不同亞型SIV分離株中，選擇有時間或地域代表性、不同抗原亞群、具有不同生物學(xué)特征的毒株進行全基因克隆和序列測定。已完成15株H1N1亞型SIV 120個基因的克隆和序列測定，初步建立了H1N1亞型SIV分離株HA、NA、NP、M、NS、PA、PB1及PB2基因的分子流行病學(xué)、分子變異與遺傳演化基因信息數(shù)據(jù)庫。完成了21株H3N2亞型 HA基因、25株NA基因、21株NP基因、25株M基因、25株NS基因的克隆和序列測定，對核苷酸序列和相應(yīng)的氨基酸序列信息進行了分析和比較性研究，積累了豐富的H3N2亞型SIV一級結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)，儲備了雄厚的相關(guān)技術(shù)及數(shù)據(jù)。也完成了6株H9N2亞型SIV 42個基因的克隆和序列測定以及2株H5N1亞型SIV 16個基因的克隆和序列測定工作，建立了H5和H9亞型SIV分離株HA、NA、NP、M、NS、PA、PB1及PB2基因的分子流行病學(xué)、分子變異與遺傳演化基因信息數(shù)據(jù)庫。

研究發(fā)現(xiàn): 中國華北、華中、華東及華南地區(qū)豬群中至少存在H1N1、H1N2、H3N2 3種亞型SIV的共同進化。福建、廣東、內(nèi)蒙等省病毒株與H9N2 AIV A/Duck/Hong Kong/Y280/97 NA基因的氨基酸同源率在96.7％－98.4％之間；H5N1 亞型AIV A/Chicken/HongKong/YU822.2/01與我國南部沿海地區(qū)H1N1亞型SIV NA基因的氨基酸同源率在98％以上，與福建、內(nèi)蒙、黑龍江省部分毒株NP基因的氨基酸同源率分別在98.2％－98.7％、97.3％－97.8％、95.1％－96.0％之間，其M基因的氨基酸同源率均在95％左右；浙江、山東、河南分離株與A/Chicken/HongKong/258/97(H5N1) M基因的氨基酸同源率在96.8％－98.1％之間；A/Goose/GuangDong/3/97(H5N1) NP基因與內(nèi)蒙2個毒株的氨基酸同源率分別為98.2％和98.7％，與福建分離株為99.1％。H5N1亞型SIV 2001年分離株對雞呈高致病性，而2003年分離株能感染豬，但對雞沒有致病性，但其HA序列裂解基元卻呈現(xiàn)高致病性AIV的特征，其HA和NA序列與H5N1亞型高致病性AIV A/Duck/Zhejiang/52/2000的核苷酸同源率高達99.3％和99.2％，而這2株病毒的宿主特異性和對雞的致病性卻完全不同。這些研究結(jié)果意味著, 在中國豬群中存在與H5N1和H9N2亞型AIV高度同源、遺傳背景近似的毒株。說明在中國豬群中存在與H5N1亞型AIV高度同源、遺傳背景近似的毒株。他們究竟在何處演化、如何演化、這些演化能否導(dǎo)致病毒致病力和宿主范圍的改變以及其潛在的公共衛(wèi)生意義如何？這將成為世界關(guān)注的最具挑戰(zhàn)性的課題！

研究結(jié)果同時表明，H3亞型SIV中國分離株屬歐亞豬譜系，其HA基因來源于水禽流感病毒，NS基因同時存在2大基因群系，廣東大部分毒株和人流感病毒分離株屬北美基因群系，內(nèi)蒙、河南、山東、福建、黑龍江及廣東部分SIV分離株屬歐亞基因群系；通過對HA1、NA糖蛋白二級結(jié)構(gòu)的預(yù)測發(fā)現(xiàn)，SIV中國不同地區(qū)分離株與參考毒株相比，其二級結(jié)構(gòu)已發(fā)生明顯的改變，主要體現(xiàn)在α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲的數(shù)目及位置的不同，可見HA和NA基因的點突變、堿基的缺失或插入會導(dǎo)致其蛋白功能的改變。H1亞型SIV分離株大部分屬經(jīng)典美洲豬譜系。進一步證實在中國內(nèi)陸存在“禽-豬-人” 的流感病毒種間傳播；并提出在中國存在“（水）禽-豬-（水）禽”及“人-豬-人”的種間傳播機制。

3 結(jié)束語 

豬的呼吸道上皮細胞表面同時存在流感病毒的2種受體，并且SIV HA序列上受體結(jié)合位點具有與人流感病毒受體(唾液酸（SA）α-2,6半乳糖苷（Gal）)和禽流感病毒受體（SAα2,3-Gal）相同的結(jié)合特異性，因此，豬自然成為禽、豬、人流感病毒共同的易感宿主，成為流感病毒基因重組、新亞型流行株產(chǎn)生的活載體，同時決定了SIV也具有感染人和禽的能力，奠定了SIV在流感病毒流行株演化和種間傳播中不可替代的地位和作用。我國南部沿海地區(qū)正處于全球候鳥遷徙路線上，同時該區(qū)水網(wǎng)密布，四季放養(yǎng)或混養(yǎng)著雞、鴨、鵝、豬等，而且人與之接觸頻繁，這種特有的生態(tài)條件和生活習(xí)慣使流感病毒得以在人、豬和禽（雞、鴨等）之間交叉循環(huán)感染，給病毒提供了特有而復(fù)雜的演化環(huán)境和孵育溫床，各種新亞型的A型流感病毒都可能在該地區(qū)重組或突變產(chǎn)生。因此，中國（特別是中國南部）一直是世界流感研究地域上的重中之重。我們的研究已表明，H1N2、H5N1和H9N2亞型SIV已出現(xiàn)在中國豬群，究竟其遺傳演化規(guī)律如何以及在AIV突破“禽－人”種間屏障中起何作用，將成為世界SI研究的新熱點，中國SI研究的新進展將是對世界流感研究的重要新貢獻。

 

SI是一種群發(fā)性的呼吸系統(tǒng)疾病，其病程、病情及嚴重程度隨病毒毒株、豬的年齡和免疫狀態(tài)、環(huán)境因素以及并發(fā)或繼發(fā)感染的差異而表現(xiàn)不同。因此，對SI的防制，應(yīng)從群體出發(fā)，以計劃免疫為核心，實行綜合防制措施。

強化“預(yù)防為主、養(yǎng)防結(jié)合、防重于治”的理念，以滅活疫苗為“免疫硬件”，以首免和加免為主線，以母源、補白、調(diào)整、應(yīng)急免疫為輔線，以多聯(lián)和群體免疫為方向，以免疫質(zhì)量評價技術(shù)為標(biāo)準(zhǔn)，建立嚴格的衛(wèi)生管理制度，努力改善豬群日常管理及環(huán)境以減低豬的應(yīng)激因素，可有效地預(yù)防和控制SI的發(fā)生和流行。

嚴格檢疫制度，不從疫區(qū)引種，從外地引進種豬，必須了解產(chǎn)地的疫情和飼養(yǎng)管理狀況并進行嚴格檢疫；從國外引種時，必須經(jīng)過國家海關(guān)對相關(guān)疾病的嚴格檢疫，合格時方可引入。

養(yǎng)豬場應(yīng)加強豬病的日常監(jiān)測（包括病原監(jiān)測和抗體監(jiān)測），以提高動物群體“有效免疫”的整體保護水平，一旦發(fā)現(xiàn)血清學(xué)陽性的豬群，應(yīng)及時進一步確診，采取可行的措施，密切注視流行動向，防止疫源擴散。

加強飼養(yǎng)管理，實行“全進全出”制度。一批豬出欄后，豬舍經(jīng)清洗、消毒后空置1~2周方可引進下一批豬。

嚴格控制參觀養(yǎng)豬場，必要時經(jīng)場長或主管獸醫(yī)許可方可進入?yún)⒂^。參觀人員必須遵守場內(nèi)防疫制度，經(jīng)洗澡、更換場區(qū)工作服及鞋帽方可進入，并按指定路線參觀。

生產(chǎn)人員進入生產(chǎn)區(qū)，應(yīng)穿工作服和工作鞋帽。工作服和工作鞋帽應(yīng)經(jīng)常清洗、消毒。工作人員嚴禁相互串棟。

豬場工作人員不許在場外或自己家中飼養(yǎng)和從事與養(yǎng)豬有關(guān)的業(yè)務(wù)，養(yǎng)豬場工作人員所需的豬肉產(chǎn)品必須經(jīng)檢疫，最好由本場提供。

定期對豬舍及豬群進行噴霧消毒；應(yīng)保持料槽的清潔，定期清洗消毒；及時清理墊料和糞便，保持清潔衛(wèi)生；場內(nèi)消毒池要經(jīng)常換消毒液，以保持有效濃度。

豬舍應(yīng)封閉，防止活體媒介物與豬群接觸。搞好環(huán)境衛(wèi)生，消滅蚊、蠅、老鼠及其它昆蟲進入場內(nèi)。

對于易帶來外界疫源的媒介物（包括工作人員、推銷員、銷售商、運送工人、來訪客等），都應(yīng)嚴加管理和監(jiān)督。所有的一切用具和運輸工具都須經(jīng)嚴格消毒后，才能進入豬場。場內(nèi)獸醫(yī)人員不能對外診病。

養(yǎng)豬場水源應(yīng)來源于自場的井水或自來水，禁止直接飲用河流、池塘和湖泊水。

以上措施是通過豬群的整體保健措施的全面實施來達到防治和減少SI的發(fā)生和流行。

以下措施可在生產(chǎn)實踐中作為參考：

預(yù)防：豬流感更易并發(fā)或繼發(fā)其它疾病而導(dǎo)致嚴重經(jīng)濟損失，因此最好通過生物安全措施和免疫接種預(yù)防其發(fā)生。在歐美國家，免疫接種已成為預(yù)防SI的重要手段。加快豬流感疫苗的研制和開發(fā)也將成為必要，及時進行免疫接種能夠提供很好的保護力，但必須明確所發(fā)生流感的亞型，有時需接種不同亞型的雙價苗。以全滅活豬流感病毒或其免疫蛋白(血凝素抗原和神經(jīng)氨酸酶抗原)制成的SI疫苗，主要依靠產(chǎn)生血液抗體而提供保護。同時，飼料中添加“康倍斯諾”對豬的機體免疫力的提升和疫苗的接種效果有著至關(guān)重要的作用。

中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所用中國流行株研制出油包水型H1、H3亞型單價及H1-H3雙價滅活疫苗，安全、有效，對仔豬、育肥豬、母豬均具有免疫保護，有效降低臨床癥狀：高熱、咳嗽、呼吸困難等，增加平均日增重，顯著改善飼料轉(zhuǎn)化率，有效預(yù)防和控制H1、H3亞型SI的擴散和蔓延?，F(xiàn)實驗室的所有試驗已完成，正進入中間試制和區(qū)域試驗階段。

免疫途徑：肌肉注射或皮下接種

免疫程序：

小豬每頭份2ml，兩次免疫間隔2-3周

種豬配種前或配種時或分娩前免疫，每頭份4ml，首免后間隔2-3周加強免疫，以后每年免疫2次

優(yōu)點：對抗原性相似的同亞型毒株有75-100%的抗感染保護作用。

局限性：⑴ 對不同血清亞型保護性差；⑵ 滅活免疫產(chǎn)生的免疫力較慢。

治療：對豬流感目前沒有特異的治療方法，必須采取果斷的綜合性措施來降低其死亡率，鹽酸金剛烷胺和鹽酸金剛乙胺有一定的抗流感病毒作用，金剛烷胺對豬流感的防治效果隨用藥時間的不同而表現(xiàn)出差異，在感染的同時或在感染后1~3天用藥，豬群的發(fā)病率和病死率會有不同程度的降低。但在用藥豬群中會有散毒現(xiàn)象，并有抗藥性病毒株的出現(xiàn)。

以下措施對豬流感有一定的治療和緩解作用，是減少損失的有效途徑：（1）用百毒殺、強力消毒靈、碘力殺等消毒劑進行消毒，并將病豬隔離；（2）試用復(fù)方嗎啉胍片或復(fù)方金剛烷胺片和板藍根沖劑，抑制病毒繁殖，減少病毒傳播和排毒，用量根據(jù)豬的體重及藥品含量確定。（3）抗感染、抗應(yīng)激：應(yīng)用抗生素可防止或減輕細菌性并發(fā)或繼發(fā)感染；重癥病豬應(yīng)服用抗生素或磺胺類藥品，同時給予止咳祛痰藥。如泰磺安每50克配10公斤料每天飼喂2次，或土霉素堿＋磺胺二甲嘧啶混合拌料均有一定效果。用維生素C（500克/噸，拌料或飲水）可抗應(yīng)激。（5）選用疫苗進行緊急免疫接種，縮短病程，減少病毒的傳播。（6）補充體液，如人工輸液或飲水中添加電解多維和葡萄糖等。（7）中草藥：蘇葉100克、薄荷100克、藿香100克、荊芥100克、蒼術(shù)100克、防風(fēng)100克、雙花120克、黃芪100克、甘草30克。該配方為100頭仔豬一天用量，連服2天。同時，飼料中添加“康倍斯諾”對豬的機體免疫力的提升和疫苗的接種、藥效的釋放有著至關(guān)重要的作用。